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論文:《如何科學(xué)地開設(shè)生化實(shí)驗(yàn)》

時(shí)間:2021-06-12 12:52:56 論文 我要投稿

論文精選:《如何科學(xué)地開設(shè)生化實(shí)驗(yàn)》

  【摘 要】

論文精選:《如何科學(xué)地開設(shè)生化實(shí)驗(yàn)》

  隨著我國醫(yī)學(xué)教育改革的不斷深入,醫(yī)學(xué)教育的目標(biāo)已發(fā)展為培養(yǎng)高素質(zhì)、強(qiáng)能力、具有創(chuàng)新精神的綜合型人才。醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)是培養(yǎng)醫(yī)學(xué)人才的重要環(huán)節(jié),根據(jù)我院的實(shí)際情況,生化實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目按照“基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn)”“綜合性實(shí)驗(yàn)”“設(shè)計(jì)創(chuàng)新性實(shí)驗(yàn)”三大板塊進(jìn)行開設(shè),聯(lián)系后續(xù)課程內(nèi)容及臨床。然而我院本科醫(yī)學(xué)生的生化實(shí)驗(yàn),有一部分實(shí)驗(yàn)受到了學(xué)時(shí)不足、開設(shè)難度大的限制,為了解決這一難題,我們生化實(shí)驗(yàn)室運(yùn)用了“倒敘法”合理縮短了學(xué)時(shí),科學(xué)地開設(shè)實(shí)驗(yàn)。下面我將就我們實(shí)驗(yàn)室開設(shè)的幾個(gè)采用“倒敘法”的實(shí)驗(yàn)進(jìn)行闡述。

  【關(guān)鍵詞】

  生化實(shí)驗(yàn) 倒敘法 科學(xué)

  為了適應(yīng)高等醫(yī)學(xué)院校基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)的發(fā)展要求,培養(yǎng)醫(yī)學(xué)生的實(shí)踐能力和創(chuàng)新能力,我院針對全院本科醫(yī)學(xué)生的生物化學(xué)教學(xué)內(nèi)容進(jìn)行了合理地調(diào)整,增加了有利于學(xué)習(xí)掌握生物化學(xué)新技術(shù)、培養(yǎng)學(xué)生科研能力的較大型綜合創(chuàng)新性實(shí)驗(yàn)。原則上我院要求本科生生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)在四學(xué)時(shí)內(nèi)完成,然而聚丙烯酰胺凝膠盤狀電泳、醋酸纖維素薄膜電泳分離血清蛋白質(zhì)和蔗糖酶與淀粉酶的專一性這幾個(gè)實(shí)驗(yàn),四個(gè)學(xué)時(shí)是遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠的。在教學(xué)要求與教學(xué)條件的矛盾沖突下,我們實(shí)驗(yàn)室就采用“倒敘法”來順利完成這些實(shí)驗(yàn)。

  聚丙烯酰胺凝膠盤狀電泳實(shí)驗(yàn)按照正常的操作順序應(yīng)該是:1.制備分離膠;2.制備濃縮膠;3.準(zhǔn)備電泳槽;4.上樣;5.電泳;6.剝膠;7.固定、染色、漂洗;8.觀察結(jié)果。而我們實(shí)驗(yàn)室則采用“倒敘法”,第一輪實(shí)驗(yàn)所需要的凝膠包括分離膠和濃縮膠都由實(shí)驗(yàn)室的老師準(zhǔn)備就緒,往后每一輪實(shí)驗(yàn)所需的凝膠由上一輪實(shí)驗(yàn)的同學(xué)制備,將這個(gè)實(shí)驗(yàn)分段同時(shí)進(jìn)行。具體操作則變?yōu)椋?.準(zhǔn)備電泳槽;2.上樣;3.電泳(電泳所需要的時(shí)間大概為一個(gè)小時(shí)左右,在這一個(gè)小時(shí)跑電泳的時(shí)間里,我們可以完成后續(xù)的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容);4.制備分離膠;5.濃縮膠制備;6.剝膠;7.固定與染色、脫色;8.觀察結(jié)果。要合理地運(yùn)用時(shí)間來完成這個(gè)實(shí)驗(yàn)。

  醋酸纖維素薄膜電泳分離血清蛋白質(zhì)的實(shí)驗(yàn)中,我們也是先電泳以后再具體講原理和操作步驟以及方法。按照正常的程序應(yīng)該是先講實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?shí)驗(yàn)原理、實(shí)驗(yàn)器材與試劑,然后再重點(diǎn)講解實(shí)驗(yàn)步驟,講完以后同學(xué)們再開始操作。然而我們先簡單地介紹一下實(shí)驗(yàn)操作,然后開始點(diǎn)樣,點(diǎn)完樣以后再上樣和進(jìn)行電泳。電泳跑上了以后我們再繼續(xù)接著講實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?shí)驗(yàn)原理、實(shí)驗(yàn)器材與試劑,再詳細(xì)介紹實(shí)驗(yàn)步驟,及每一個(gè)步驟需要注意的注意事項(xiàng)。薄膜準(zhǔn)備:一般要浸泡半個(gè)小時(shí)以上,每一次都由實(shí)驗(yàn)室的老師先準(zhǔn)備好;儀器準(zhǔn)備:剪裁尺寸合適的“濾紙橋”是用來聯(lián)系醋酸纖維薄膜和兩極緩沖液之間的中間 “橋梁”(也由實(shí)驗(yàn)室的老師準(zhǔn)備好);點(diǎn)樣;電泳:調(diào)節(jié)電壓,預(yù)電泳(50V,5min),然后再調(diào)節(jié)至120V左右,通電45分鐘,待電泳區(qū)帶展開至薄膜三分之二處時(shí),停止通電;染色:用鑷子小心將薄膜取出,浸于氨基黑10B染色液中染色1-3分鐘;漂洗:漂洗3次干凈的薄膜用濾紙吸干,可見5條界限清晰的區(qū)帶;定量分析:剪下薄膜各蛋白色帶分別放入NaOH溶液中,30分鐘后去測其吸光度值;計(jì)算:計(jì)算各蛋白的相對百分含量和A/G比值。這樣就有效地縮短了學(xué)時(shí),圓滿地完成了實(shí)驗(yàn)。

  蔗糖酶與淀粉酶的專一性實(shí)驗(yàn)中,實(shí)驗(yàn)的`操作步驟:1.酵母蔗糖酶提出液制備:取鮮酵母(面包酵母)1小勺,放在小試管內(nèi),倒入甲苯1~2ml,用粗玻璃棒攪拌約30~45分鐘使酵母液化,然后加蒸餾水3~5ml,充分混勻。3000轉(zhuǎn)/分離心10分鐘,傾棄上清液,保留沉淀于小試管中,加蒸餾水1.5ml,甲苯0.2ml,混勻,在30℃水浴中過夜。次日取出,用玻璃棒攪勻,一邊攪拌一邊加3~5%稀醋酸,調(diào)節(jié)pH至3.5~4.0(用pH試紙測試),離心(3000轉(zhuǎn)/分)10分鐘。將上清液傾入潔凈的燒杯內(nèi),加入少量硅藻土(約一小匙),混勻,3000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘。上清液用氨水中和至pH 5左右,放4℃冰箱保存?zhèn)溆谩J褂们翱筛鶕?jù)實(shí)驗(yàn)需要的活性大小適當(dāng)稀釋。2.準(zhǔn)備稀釋唾液(淀粉酶的來源):實(shí)驗(yàn)者先用水漱口,然后含一口蒸餾水于口中輕漱一、二分鐘,吐入小燒杯中。3.取6支試管按表格依次加入試劑,每管混勻后置于37℃恒溫水浴中保溫30min。另取大試管6支,每支試管中加Benedict試劑1ml(約20滴),加熱煮沸后,分別將保溫后的試管中的液體加入之,繼續(xù)煮沸2分鐘,放試管架上冷卻,觀察并記錄結(jié)果。解釋實(shí)驗(yàn)結(jié)果。操作步驟中要求在30℃水浴中過夜,所以過夜這一部分的內(nèi)容由實(shí)驗(yàn)室的老師提前給同學(xué)們準(zhǔn)備好。同學(xué)們從次日取出開始操作,做完以后在保溫的30min時(shí)間里再做過夜的這一部分,做完又可以給下一個(gè)班的同學(xué)使用。這樣輪回倒轉(zhuǎn)法使我們的實(shí)驗(yàn)有序完成。

  這些實(shí)驗(yàn)運(yùn)用“倒敘法”在我院已通過多年的實(shí)踐,在圓滿完成本實(shí)驗(yàn)的全面教學(xué)的同時(shí),讓原來的四個(gè)學(xué)時(shí)完成不了的成為可能,既滿足了人才培養(yǎng)的教學(xué)需要,又克服了學(xué)時(shí)不足的現(xiàn)實(shí)條件,為實(shí)現(xiàn)創(chuàng)新人才培養(yǎng)目標(biāo)、促進(jìn)實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革奠定了基礎(chǔ)。

  【參考文獻(xiàn)】

  [1]黃春霞,龍昱.生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教程[M].北京:北京大學(xué)醫(yī)學(xué)出版社,2014.

  [2]歐陽文英,唐瑋蔚.臨床專業(yè)認(rèn)證中生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)的改革與實(shí)施[J].考試周刊,2014(96).

  [3]胡桔紅,歐陽文英,湯婷,等.如何科學(xué)的開設(shè)聚丙烯酰胺凝膠盤狀電泳[J].青春歲月,2012(23).

【論文:《如何科學(xué)地開設(shè)生化實(shí)驗(yàn)》】相關(guān)文章:

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